在做檢測時,有不少關(guān)于“高效液相色譜檢測器有哪幾種”的問題,這里百檢網(wǎng)給大家簡單解答一下這個問題。
高效液相色譜檢測器種類包括:紫外-可見光檢測器、熒光檢測器、電化學(xué)檢測器、質(zhì)譜檢測器、蒸發(fā)光散射檢測器、折光指數(shù)檢測器、激光光散射檢測器等。本文將詳細(xì)介紹這幾種常見的高效液相色譜檢測器:
高效液相色譜檢測器類型一覽
1、紫外-可見光檢測器
紫外-可見光檢測器是HPLC中最常用的檢測器之一。通過測量樣品在紫外或可見光區(qū)域的吸光度來實現(xiàn)對組分的檢測。紫外-可見光檢測器具有靈敏度高、線性范圍寬、操作簡便等優(yōu)點,用于蛋白質(zhì)、核酸、有機化合物等的分析。
2、熒光檢測器
熒光檢測器通過測量樣品在激發(fā)光照射下產(chǎn)生的熒光信號來實現(xiàn)對組分的檢測。熒光檢測器具有高靈敏度、選擇性強等優(yōu)點,特別適用于那些在紫外-可見光區(qū)域沒有明顯吸收的化合物,如某些生物分子、有機染料等。熒光檢測器用于生物分析、藥物分析等領(lǐng)域。
3、電化學(xué)檢測器
電化學(xué)檢測器通過測量樣品在電極表面發(fā)生的氧化還原反應(yīng)產(chǎn)生的電流信號來實現(xiàn)對組分的檢測。電化學(xué)檢測器具有靈敏度高、選擇性強、響應(yīng)速度快等優(yōu)點,特別適用于那些具有電活性的化合物,如某些有機化合物、金屬離子等。電化學(xué)檢測器用于在環(huán)境監(jiān)測、藥物分析等領(lǐng)域。
4、質(zhì)譜檢測器
質(zhì)譜檢測器通過測量樣品離子的質(zhì)荷比來實現(xiàn)對組分的檢測。質(zhì)譜檢測器具有高靈敏度、高選擇性、信息豐富等優(yōu)點,可以提供化合物的分子量、結(jié)構(gòu)等信息。質(zhì)譜檢測器在蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)、藥物分析等領(lǐng)域具有重要應(yīng)用。質(zhì)譜檢測器與HPLC的聯(lián)用,即液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)。
5、蒸發(fā)光散射檢測器
蒸發(fā)光散射檢測器通過測量樣品在蒸發(fā)過程中產(chǎn)生的光散射信號來實現(xiàn)對組分的檢測。蒸發(fā)光散射檢測器具有通用性強、對樣品的紫外吸收特性不敏感等優(yōu)點,特別適用于那些在紫外-可見光區(qū)域沒有明顯吸收的化合物,如糖類、脂類等。蒸發(fā)光散射檢測器用于食品分析、藥物分析等領(lǐng)域。
6、折光指數(shù)檢測器
折光指數(shù)檢測器通過測量樣品在流動相中的折光指數(shù)變化來實現(xiàn)對組分的檢測。折光指數(shù)檢測器具有無破壞性、無需樣品預(yù)處理等優(yōu)點,適用于那些對樣品有特殊要求的分析,如某些生物大分子、藥物制劑等。折光指數(shù)檢測器用于生物制藥、藥物制劑分析等領(lǐng)域。
7、激光光散射檢測器
激光光散射檢測器通過測量樣品在激光照射下產(chǎn)生的光散射信號來實現(xiàn)對組分的檢測。激光光散射檢測器具有高靈敏度、高分辨率等優(yōu)點,特別適用于那些需要測量粒徑分布、分子量分布的樣品,如聚合物、蛋白質(zhì)聚集體等。激光光散射檢測器運用于材料科學(xué)、生物技術(shù)等領(lǐng)域。
高效液相色譜檢測器使用注意事項
1、脫氣:HPLC系統(tǒng)內(nèi)不希望有氣泡存在。常用的脫氣方法包括吹氦脫氣法、加熱回流法、抽真空脫氣法、超聲波脫氣法和在線脫氣法。
2、過濾:任何顆粒物進(jìn)入HPLC系統(tǒng)都可能堵塞柱子,導(dǎo)致系統(tǒng)壓力增加和色譜峰變形。流動相、樣品和儀器系統(tǒng)部件的磨損物都需要過濾。
3、沖洗:保持HPLC系統(tǒng)的清潔。流動相儲液瓶、泵、自動進(jìn)樣器、色譜柱和檢測器都需要定期沖洗。
4、流動相的選擇:流動相需要色譜純度,水應(yīng)使用20mΩ的去離子水。脫氣后的流動相要小心操作,避免引入氣泡。
5、柱子的保護(hù):色譜柱非常脆弱,第一次使用時應(yīng)避免讓液體過柱子。所有過柱子的液體都需要嚴(yán)格過濾,以防止柱子堵塞。
6、壓力控制:壓力不能太大,最好不要超過2000psi。過高的壓力可能會損壞色譜柱和檢測器。
7、檢測波長的選擇:選擇波長時要考慮溶劑的截止波長,確保檢測波長大于溶劑的截止波長。
8、樣品處理:樣品在進(jìn)樣前需要過濾,以防止顆粒物進(jìn)入系統(tǒng)。